酶聯免疫吸附實驗是一種用來定量檢測樣本中某種抗原的方法。抗原是一種會導致動物免疫系統發起防御反應的毒素或其他外來物質,例如流感病毒或環境污染物。潛在抗原的范圍很廣,因此在許多研究和檢測領域中使用 ELISA 來檢測和定量各種樣本類型中的抗原。使用 ELISA 分析細胞裂解物、血樣、食品等特定物質。ELISA 有四種主要類型:直接法、間接法、競爭法和雙抗夾心法。
檢測試劑盒采用雙抗體夾心法檢測S蛋白,試劑盒中含有包被過的聚苯乙烯酶標板,酶標板的微孔中包被有抗S蛋白的抗體。將稀釋后的標準品或待檢樣本加入微孔中孵育,如果存在S蛋白,將會被預包被的抗體捕獲,洗滌微孔以去除非特異結合的物質。將辣根過氧化物酶標記的抗S蛋白的抗體加入微孔,這種被標記的抗體將會與微孔中的抗原-抗體復合物結合形成夾心復合物,洗滌去除多余未結合的標記抗體。向微孔中加入包含過氧化氫的底物緩沖液,以及3,3'5,5'四甲基聯苯胺(TMB),加入底物緩沖液后顯示藍色即表示有S蛋白存在,顯色強度與樣本中S蛋白濃度呈正比。用硫酸終止液終止反應的進行,酶標儀在450 nm波長激發光下測量OD值,根據標準品濃度與OD 值繪制的標準曲線,可計算出待檢樣本中S蛋白的含量。
檢測試劑盒儲存要求:
試劑盒標準品于-35~-15℃及以下可穩定12個月,建議于-85~-65℃儲存。標準品開啟使用后,2~8℃儲存應在1天內使用。若需多次使用,應根據需要進行分裝,于-35~-15℃及以下凍存,可以儲存3個月,不可反復凍融;
試劑盒中其余組份于2~8℃儲存,防止冷凍,避免強光照射,有效期12個月。