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詳解探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性

更新時間：2022-02-24　點擊量：488
　　探針法熒光定量PCR試劑盒使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應特異性高，大程度地避免了非特異擴增；反應緩沖液經充分優化，反應靈敏快速，多個循環只需二十多分鐘；抗干擾的能力強，反應重復性好，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
　　探針法熒光定量PCR試劑盒安全使用注意：
　　使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經短暫離心后使用。
　　所有操作嚴格按照說明書進行;
　　反應液應避光保存;
　　避免反復凍融，開啟后盡量在三個月內使用完畢。
　　試劑盒內各種組分使用前應自然融化，混勻并短暫離心;
　　反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需I蓋緊;
　　使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服;
　　樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行，以免交叉污染。
　　探針法熒光定量PCR試劑盒檢測方法的局限性：
　　樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
　　陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果;
　　病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果;
　　樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現假陽性結果;
　　不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果;
　　試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果。