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細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具,依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板,形狀、規格、用途多樣,那么如何選擇適合的培養板?
1.細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型)
不同形狀的培養板有不同用途。培養細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養板。要特別注意材質, 標示“Tissue Culture (TC) Treated"是養細胞用的。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面,當做兩種不同淋巴細胞混合培養時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內內。圓底培養板還會用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如“混合淋巴細胞培養"等。V型板常用做細胞殺傷、免疫學血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后,低速離心)。
2.培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等
大多數用戶在組織培養瓶上開始組織培養。不過,許多應用也需要多孔板。理想的數量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機器人的協助。completely手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板,就更加需要機器人,而1536孔板更是絕對需要。當然,高密度多孔板的挑戰還在于分析小型化。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應用息息相關。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數的儀器時,底部應該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數的儀器時,應選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應用通常使用黑色表面,以吸收激發信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串擾。
4. 表面處理
選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養的是懸浮細胞還是貼壁細胞。對于懸浮或球體細胞培養,建議使用BRAND inertGrade™微孔板,它經過patent的疏水凝膠處理,可抑制細胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標準的組織培養表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),或涉及到嚴格洗滌的應用,建議使用BRAND的cellGrade™微孔板。這種unique的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質的物理變化,因此不需要冷藏。對于那些敏感細胞或血清量減少的細胞,建議使用cellGrade™ plus表面。
5.根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板
Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結構。細胞培養板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有low binding surface。
具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。
平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇
1.貼壁細胞一般用平底培養板。
2.懸浮型細胞的培養一般用V型。
3.U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。
4.V型培養板有時用做免疫學血凝集的實驗。
酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液。常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
平底的什么類型的細胞都可用,但當細胞數目較少,如做克隆時,就用96孔平底板。
另外﹐做MTT等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。
問題1:培養板有4、6、12、24、48、96孔幾種規格 ,但不知道到底什么實驗用哪種規格?
答:要根據具體的實驗要求,流式一般用6孔,MTT一般用96孔,細胞爬片一般用24孔等!要具體根據實驗來定。
問題2:請問Terasaki板與普通細胞培養板有什么區別?
答:Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。
有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產品的外形結構也不同。
材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結構。
細胞培養板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有low binding surface,有關更多實驗材料上的應用與對材料的選擇。
問題3:想測吸光度用酶標儀,用多孔細胞培養板行嗎?請問酶標板多孔細胞培養板有什么區別?
答:用多空細胞培養板測吸光度肯定可以拉,我們經常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。
區別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
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