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RAW264.7細胞培養總結
基本情況: 小鼠來源白血病毒誘導腫瘤細胞,屬于巨噬細胞,貼壁生長。
形態以類圓形和不規則為主,一般1~2個核,極少數有3個核,胞漿伸展時胞體較大。鏡下細胞為小珍珠似的圓形橢圓形。
2,培養情況
培養條件:10%FBS高糖DMEN,進口gibco血清更好
傳代:細胞增殖較快,70%即可傳代,細胞有觸角也提示需要傳代,1:3----1:6傳代,推薦使用皿。傳代時切記不要使用*,正常情況下此細胞貼壁不牢,直接吹打即可,*消化會使細胞伸出觸角改變形態。我是直接用培養基吹打,也可以用PBS,感覺無差異。
凍存和復蘇:和普通細胞無異。
RAW264.7作為巨噬細胞有很強的吞噬能力,吞噬抗原后伸出長角,就是大家常見的偽足。同時貼壁黏附能力增強,傳代時難以消化下來。
該細胞貼壁時間短,成片生長,似小菌落般小片生
長,zui后連,成一片并會疊層。傳代密度不易過高或者過低,過低會導致細胞生長緩慢甚至不生長,過高,細胞會長出偽足。
3, 關于RAW264.7分化,
正常細胞為貼壁不牢的圓形橢圓形細胞,分化后伸出偽足,貼壁能力增強。
避免方法,
1, 血清是進口的真血清
2, 密度不要太高或者太低,由其是需要傳代時切不可拖延時間
3, 傳代時切不可*消化,直接吹打就能下來
4, 不要污染,包括其他細胞株的污染