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細胞因子的溶解和裝配貯存方法

更新時間：2021-06-24　點擊量：756
　　細胞因子一般通過結合相應受體調節細胞生長、分化和效應，調控免疫應答。是由免疫細胞和某些非免疫細胞經刺激而合成、分泌的一類具有廣泛生物學活性的小分子蛋白質。以非特異性方式發揮生物學作用，主要參與免疫反應和炎癥反應，影響反應的強度和持續時間的長短，涉及感染免疫，腫瘤免疫，自身免疫，移植免疫等。
　　細胞因子溶解方法：用去離子水或其它緩沖液（根據說明書要求進行選擇）溶解至說明書要求的濃度(一般為0.1-1.0mg/mL，如10ug的產品，需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時不可振蕩，避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間，待細胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇：要求用去離子水溶解的產品，務必不可用鹽溶液，避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出；要求用鹽溶液溶解的產品，請依照說明書上的濃度，同樣也是為了避免過高的鹽濃度。
　　細胞因子的分裝和貯存：蛋白溶解后可根據自己的實驗需要進一步稀釋成工作液，稀釋可用RPMI1640、DMEM或PBS等溶液，其中最好含有5-10%的FCS或0.5%的BSA來穩定蛋白。工作液在4℃可保存1周，如需長期保存，則需分裝凍存于-20℃。分裝時每管中工作液的體積最好是一次實驗的用量，以實現每次實驗用完一只工作液，避免反復凍融引起蛋白活性的降低。