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探針法熒光定量PCR試劑盒中qPCR探針法采用的幾種方式

更新時間：2020-03-04　點擊量：835
　　探針法熒光定量PCR試劑盒是使用探針法進行qPCR實驗的 即用型優化預混液。兼容所有的qPCR檢測儀器,多種模板。探針法熒光定量PCR試劑盒使用時僅需加入模板、探針和引物即可進行實驗。反應管中的熒光強度也是探針法檢測PCR產物量的依據。
 
　　探針法熒光定量PCR試劑盒qPCR探針法的幾種方式：
 
　　1、Taq-Man探針：Taq-Man探針法是經典的探針方法。
 
　　2、雙雜交探針：與Taq-Man法不同，雙雜交探針的供體基團和受體基團分別在兩條探針上，這兩條探針都可以與擴增產物雜交，雜交位置不同但很接近，反應時兩條探針一頭一尾雜交于擴增產物上，雜交后兩個基團距離在10nm以內，此時產生熒光共振能量轉移現象，激發光下供體基團不發光，受體基團發光，檢測受體基團的發光情況既可以確認擴增產物的情況。
 
　　3、分子信標探針：分子信標探針采用的是在反應中增加熒光基團和淬滅基團距離的方法，和Taq-Man法不同，分子信標探針不是采用酶切的方式使熒光基團和淬滅基團分離，而是通過雜交的方式改變探針二級結構，增加兩個基團的距離從而使熒光基團發光。
 
　　4、蝎形探針：蝎形探針又叫蝎形引物，因形狀類似蝎子而得名，其基本原理與分子信標探針十分類似，不同點在于，蝎形探針3’端帶了PCR引物，反應中得到的產物與蝎形探針為一個分子，探針的雜交在分子內部，而不需要兩個分子參與，從而使雜交反應更加迅速，高效。