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PCR試劑盒

簡要描述:PCR試劑盒用于常規PCR,高保真PCR,熱啟動PCR,多重PCR等實驗應用.高性能的pcr試劑盒 助您快速獲得高質量PCR擴增結果.

產品型號:

所屬分類:PCR試劑盒

更新時間:2023-01-26

詳細說明:

PCR試劑盒

它具有下列特點:

1. 即開即用,用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經過精心優化,專一性強,只擴增巴斯德氏桿菌屬,與其他微生物沒有交叉反應。

3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

規格及成分

成分

編號

十孔盒包裝

PCR MagicMix 3.0

試劑一

1 mL(紅蓋)

超純水

試劑二

1 mL(亮黃色)

巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液

試劑三

100 μL(白蓋)

巴斯德氏桿菌屬PCR 陽性對照

(1×10E8 拷貝/μL)

試劑四

50 μL(黃蓋)

核酸釋放劑(試用裝)

試劑五

20 次(1 mL,綠蓋)

使用手冊

試劑六

1 份

運輸及保存低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。

自備試劑樣品 DNA。

PCR試劑盒使用方法:

 一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容。本試劑盒免費贈送20 次核酸釋放劑試用裝,其使用手冊可以從本公司網站訂購核酸釋放劑

2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 補骨脂 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、設置 PCR 反應(40μL 體系)

3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分:

成分

N+2 個樣品管

PCR 陰性對照

PCR 陽性對照

PCR MagicMix 3.0

各 20 μL

20 μL

20 μL

巴斯德氏桿菌屬PCR引物混合液

各 2 μL

2 μL

2 μL

N+2 個樣品 DNA 模板

各 18 μL

--

--

PCR 陰性對照(水)

--

18 μL

--

PCR 陽性對照(巴斯德氏桿菌屬PCR陽性對照的 1000

倍稀釋液)

--

--

18 μL

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR 反應(35 個循環)

95℃

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

10 min

三、電泳檢測

5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix在擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽性對照必須有預期條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。

 

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